| TAZ-TFG-2024-2230 |
Identificación de nuevos genes relacionados con las resistencia y germinación de esporos de B.subtilis
Bellón García, Jorge
Gayán Ordás, Elisa (dir.) ; Gómara Utrilla, Paula (dir.)
Universidad de Zaragoza,
VET,
2024
Departamento de Producción Animal y Ciencia de los Alimentos, Área de Tecnología de Alimentos
Graduado en Ciencia y Tecnología de los Alimentos
Resumen: La producción de alimentos seguros y estables, y que a su vez conserven lo máximo posible sus atributos sensoriales y nutricionales, supone un gran reto para la industria alimentaria, en parte por la contaminación de las materias primas con esporos bacterianos. Los esporos son
extremadamente resistentes, de forma que para su inactivación se aplican tratamientos térmicos de alta intensidad que frecuentemente deterioran la calidad del producto. Unas de las alternativas más atractivas al calor son los tratamientos de germinación-inactivación, que consisten en inducir la
germinación para luego inactivar las células germinadas más sensibles con tratamientos de intensidad moderada. Para diseñar procesos eficientes, es necesario conocer en profundidad a nivel celular y molecular el proceso de germinación.
El objetivo de este trabajo es identificar nuevos genes relacionados con la germinación de los esporos de B. subtilis utilizando una colección de mutantes “knock-out”. Se realizó el cribado de 119 mutantes que presentaban diferencias estadísticamente significativas en los parámetros cinéticos de
germinación (longitud del hombro, velocidad de germinación y/o la eficiencia de germinación al final del ensayo) con respecto a la cepa parental determinados mediante espectrofotometría.
Posteriormente, se confirmaron las diferencias de comportamiento entre los mutantes y la cepa parental evaluando la cinética de germinación mediante recuento en placa. Finalmente, se relacionó la función de cada gen mutado con los cambios en la germinación. La deleción de los genes spoVT (que codifica un regulador transcripcional involucrado en la esporulación) o gerD (que codifica una proteína que transduce la señal del inicio de la germinación) empeoró la respuesta de los esporos a nutrientes, como se ha demostrado anteriormente. Además, los esporos carentes de spoVT respondían deficientemente al CaDPA. Por otro lado, identificamos y confirmamos la influencia de nuevos genes que hasta ahora no se habían relacionado con la
germinación: yxlH, ydeG, y ydaJ.
extremadamente resistentes, de forma que para su inactivación se aplican tratamientos térmicos de alta intensidad que frecuentemente deterioran la calidad del producto. Unas de las alternativas más atractivas al calor son los tratamientos de germinación-inactivación, que consisten en inducir la
germinación para luego inactivar las células germinadas más sensibles con tratamientos de intensidad moderada. Para diseñar procesos eficientes, es necesario conocer en profundidad a nivel celular y molecular el proceso de germinación.
El objetivo de este trabajo es identificar nuevos genes relacionados con la germinación de los esporos de B. subtilis utilizando una colección de mutantes “knock-out”. Se realizó el cribado de 119 mutantes que presentaban diferencias estadísticamente significativas en los parámetros cinéticos de
germinación (longitud del hombro, velocidad de germinación y/o la eficiencia de germinación al final del ensayo) con respecto a la cepa parental determinados mediante espectrofotometría.
Posteriormente, se confirmaron las diferencias de comportamiento entre los mutantes y la cepa parental evaluando la cinética de germinación mediante recuento en placa. Finalmente, se relacionó la función de cada gen mutado con los cambios en la germinación. La deleción de los genes spoVT (que codifica un regulador transcripcional involucrado en la esporulación) o gerD (que codifica una proteína que transduce la señal del inicio de la germinación) empeoró la respuesta de los esporos a nutrientes, como se ha demostrado anteriormente. Además, los esporos carentes de spoVT respondían deficientemente al CaDPA. Por otro lado, identificamos y confirmamos la influencia de nuevos genes que hasta ahora no se habían relacionado con la
germinación: yxlH, ydeG, y ydaJ.
Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado
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