TAZ-TFG-2016-2220

Estudio funcional del motivo regulador de hemo en FurB (Zur) de Anabaena

Sampériz López, Sandra
Fillat Castejón, María Francisca (dir.) ; Calvo Sein-Echaluce, Violeta (dir.)

Universidad de Zaragoza, CIEN, 2016
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Celular, Área de Bioquímica y Biología Molecular

Graduado en Biotecnología

Resumen: Las proteínas Fur (ferric uptake regulator) son una superfamilia de reguladores transcripcionales presentes en la mayoría de los organismos procariotas. Tienen un papel clave en la regulación del metabolismo del hierro y otros metales como zinc, manganeso y níquel. También intervienen en la regulación de otros procesos celulares clave, como la defensa frente al estrés oxidativo, metabolismo del nitrógeno, la diferenciación de heterocistos en cianobacterias o la virulencia en algunos microorganismos patógenos La cianobacteria Anabaena sp. PCC 7120 contiene tres parálogos de la familia Fur: FurA, FurB y FurC. Este estudio se centra en la proteína FurB, que se ha descrito como el regulador Zur que controla la homeostasis del zinc y que también está implicada en la regulación de la respuesta a estrés oxidativo. Estudios anteriores demuestran el papel regulador del grupo hemo en la unión de FurB al DNA. Por ello, el objetivo de este trabajo consistió en estudiar la interacción de la proteína FurB con el grupo hemo y analizar la posible implicación del motivo Cys-Pro-Val en dicha interacción. Para ello, se construyó y purificó un mutante de la proteína, C93A, en el que la cisteína 93 fue reemplazada por alanina y se efectuó la caracterización bioquímica de la proteína obtenida para comprobar cómo afectaba dicha mutación a su actividad de unión al DNA y otras características bioquímicas relevantes. La mutación de la cisteína 93 alteró las características espectroscópicas del complejo proteína-hemo y disminuyó la afinidad de la proteína por el DNA. Por ello, la cisteína 93 parece estar implicada en la coordinación del grupo hemo o al menos localizada en una región próxima al sitio de coordinación.