Caracterización de modelos genéticos de sobreexpresión de canales KCa3.1

Sáez Delgado, Manuel
Köhler, Ralf (dir.)

Meade Huerta, Patricia (ponente)

Universidad de Zaragoza, CIEN, 2017
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Celular, Área de Bioquímica y Biología Molecular

Máster Universitario en Biología Molecular y Celular

Resumen: En este trabajo se ha caracterizado un modelo de sobreexpresión de un canal de potasio activado por calcio (KCa3.1), para ello se han empleado una serie de técnicas de biología molecular y celular como son la extracción de ácidos nucleicos, electroforesis de geles de ADN o ARN, RT-PCR convencionales, así como RT-PCR cuantitativa (qRT-PCR). Se muestra que el modelo de ratón para KCa3.1 inducible por doxicilina funciona en algunos tejidos que expresan KCa3.1 como el intestino y pulmón, pero no en bazo. Aquí un tratamiento con doxiciclina durante dos semanas provoca un aumento estadísticamente significativo en la expresión de KCa3.1, en pulmón un aumento de 2.6 veces y en intestino de unas 26.7 veces. También se muestra una falta de expresión y de inducción en tejidos como cerebro e hígado que son conocidos por expresar muy pequeñas cantidades de este canal. En otros experimentos sobre un modelo de knock-out inducible para KCa3.1 que se encuentra todavía en desarrollo, una primera tanda de experimentos de qRT-PCR en bazo, confirman unos niveles de expresión normal de este canal debido a la ausencia de expresión del transactivador reverso. Estos resultados forman la base para futuros experimentos que permitan investigar la funcionalidad de este modelo knock-out.

Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Master