000008079 001__ 8079 000008079 005__ 20170831220359.0 000008079 037__ $$aTAZ-TFM-2012-187 000008079 041__ $$aspa 000008079 1001_ $$aClemente Arellano, Isabel 000008079 24500 $$aAumento racional de la estabilidad de una proteína modelo 000008079 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza$$c2012 000008079 506__ $$aby-nc-sa$$bCreative Commons$$c3.0$$uhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ 000008079 520__ $$aLas proteínas son las encargadas de llevar a cabo un gran diversidad de funciones en lo seres vivos, pero solamente serán capaces de realizarlas si adoptan la conformación adecuada. Conocer cómo es su estabilidad y cómo poder aumentarla, tiene gran interés desde varios puntos de vista: biológico (conocimiento de la Biología molecular), industrial (es común la utilización de enzimas en condiciones no fisiológicas) y biomédico (numerosas enfermedades están causadas por proteínas mal plegadas). La proteína de estudio seleccionada para este trabajo fin de máster fue la flavodoxina de Anabaena PCC7119, la cual se ajusta a un modelo de 3 estados en el proceso de desnaturalización térmico, presentando un intermediario, mientras que en el proceso de desnaturalización químico con urea se ajusta a un modelo de 2 estados. Se diseñaron de manera racional una batería de mutantes (unos basados en la WT y otros en el triple mutante E20K/E72K/D126K), con los que se pretendió conseguir de una flavodoxina mutante en la que ya no se poblara el intermediario. Se realizaron estudios de caracterización espectroscópica mediantes espectros de absorbancia UV-Visible, dicroísmo circular en el cercano, lejano y emisión de fluorescencia a 25ºC y 90ºC. También se realizaron estudios comparativos de su estabilidad, tanto de manera química como térmica, en relación con la de la WT y la del triple mutante E20K/E72/D126K. Las proteínas que se ajustaron a un modelo de 2 estados en el proceso de desnaturalización térmica mediante técnicas espectroscópicas fueron seleccionadas para realizar un estudio mediante calorimetría diferencial de barrido, obteniéndose claramente una flavodoxina mutante en la que ya no se poblaba el intermediario. 000008079 521__ $$aMáster Universitario en Biología Molecular y Celular 000008079 540__ $$aDerechos regulados por licencia Creative Commons 000008079 6531_ $$aproteínas 000008079 6531_ $$aestabilidad 000008079 6531_ $$aintermediario 000008079 700__ $$aSancho Sanz, Javier$$edir. 000008079 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$bBioquímica y Biología Molecular y Celular$$cBioquímica y Biología Molecular 000008079 8560_ $$f509777@celes.unizar.es 000008079 8564_ $$s2903483$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/8079/files/TAZ-TFM-2012-187.pdf$$yMemoria (spa) 000008079 909CO $$ooai:zaguan.unizar.es:8079$$pdriver$$ptrabajos-fin-master 000008079 950__ $$a 000008079 980__ $$aTAZ$$bTFM$$cCIEN