Repositorio Zaguan - Universidad de Zaragoza 

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000008913 037__ $$aTAZ-TFM-2012-747
000008913 041__ $$aspa
000008913 1001_ $$aVirumbrales Muñoz, María
000008913 24500 $$aRelación entre los filamentos intermedios y la mitocondria
000008913 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza$$c2012
000008913 506__ $$adenied
000008913 500__ $$aCon la colaboración de la empresa Exopol.
000008913 520__ $$aLos filamentos intermedios son uno de los tres tipos de fibras que componen el citoesqueleto, junto con los microfilamentos y los microtúbulos. Se sabe que éstos últimos participan en el movimiento de las mitocondrias por el citoplasma, junto con proteínas motoras. A través de estudios y datos previos se ha relacionado a los filamentos intermedios de tipo III, y en concreto a la vimentina, con la dinámica mitocondrial, aunque apenas hay literatura al respecto.En el presente Trabajo de Fin de Máster se presenta una metodología empleada para tratar de elucidar si los filamentos intermedios son proteínas de localización mitocondrial. Si es así, sus genes podrían ser responsables de patologías neurodegenerativas que, hasta la fecha, tienen una etiología desconocida. A este efecto: 1) se evaluó la probabilidad que los diferentes filamentos intermedios presentan de entrar a mitocondria analizando su secuencia mediante programas bioinformáticos; 2) seguidamente se clonaron algunos filamentos intermedios que presentaban alta probabilidad de ser importados a mitocondria y se generaron constructos de fusión con proteínas reporteras como una oxidasa alternativa, o proteínas fluorescentes; 3) Por último, se generaron partículas lentivirales para inducir la expresión de las proteínas de fusión en células eucariotas en cultivo en monocapa y se inició el análisis de su posible efecto. La enzima oxidasa alternativa provee un método de selección metabólica en células carentes de DNA mitocondrial (denominadas ρ0), para determinar si la proteína cuya expresión se ha inducido en las células es capaz de entrar a la mitocondria. Los constructos con proteínas fluorescentes permitieron observar los filamentos intermedios mediante microscopía de fluorescencia y permitirán su análisis mediante videomicroscopía “in vivo” para evaluar si existe co-localización con la mitocondria.
000008913 521__ $$aMáster en Biología Molecular y Celular
000008913 540__ $$aEl autor no autoriza la difusión del texto completo de su obra
000008913 6531_ $$amitocondria
000008913 6531_ $$acitoesqueleto
000008913 6531_ $$afilamentos intermedios
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000008913 6531_ $$ainfección
000008913 6531_ $$avector lentiviral
000008913 6531_ $$aplásmido
000008913 700__ $$aBayona Bafaluy, María Pilar$$edir.
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000008913 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$bBioquímica y Biología Molecular y Celular$$cBioquímica y Biología Molecular
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