Universidad de Zaragoza Custodiado por la Biblioteca de la Universidad de Zaragoza Premis-plugin for CDSInvenio, developed by Miguel Martín Miguel Martín González 02408nmm 2200000 a 4500

2012-12-18

spa Virumbrales Muñoz, María Bayona Bafaluy, María Pilar Fernández Silva, Patricio http://zaguan.unizar.es/record/8913 Los filamentos intermedios son uno de los tres tipos de fibras que componen el citoesqueleto, junto con los microfilamentos y los microtúbulos. Se sabe que éstos últimos participan en el movimiento de las mitocondrias por el citoplasma, junto con proteínas motoras. A través de estudios y datos previos se ha relacionado a los filamentos intermedios de tipo III, y en concreto a la vimentina, con la dinámica mitocondrial, aunque apenas hay literatura al respecto.En el presente Trabajo de Fin de Máster se presenta una metodología empleada para tratar de elucidar si los filamentos intermedios son proteínas de localización mitocondrial. Si es así, sus genes podrían ser responsables de patologías neurodegenerativas que, hasta la fecha, tienen una etiología desconocida. A este efecto: 1) se evaluó la probabilidad que los diferentes filamentos intermedios presentan de entrar a mitocondria analizando su secuencia mediante programas bioinformáticos; 2) seguidamente se clonaron algunos filamentos intermedios que presentaban alta probabilidad de ser importados a mitocondria y se generaron constructos de fusión con proteínas reporteras como una oxidasa alternativa, o proteínas fluorescentes; 3) Por último, se generaron partículas lentivirales para inducir la expresión de las proteínas de fusión en células eucariotas en cultivo en monocapa y se inició el análisis de su posible efecto. La enzima oxidasa alternativa provee un método de selección metabólica en células carentes de DNA mitocondrial (denominadas ρ0), para determinar si la proteína cuya expresión se ha inducido en las células es capaz de entrar a la mitocondria. Los constructos con proteínas fluorescentes permitieron observar los filamentos intermedios mediante microscopía de fluorescencia y permitirán su análisis mediante videomicroscopía “in vivo” para evaluar si existe co-localización con la mitocondria. info:eu-repo/semantics/closedAccess Fulltext access not authorized info:eu-repo/semantics/bachelorThesis info:eu-repo/semantics/publishedVersion application/pdf 2012-09-04 02408nmm 2200000 a 4500 8913 TAZ-TFM-2012-747 spa Virumbrales Muñoz, María Relación entre los filamentos intermedios y la mitocondria Zaragoza Universidad de Zaragoza 2012 denied Con la colaboración de la empresa Exopol. Los filamentos intermedios son uno de los tres tipos de fibras que componen el citoesqueleto, junto con los microfilamentos y los microtúbulos. Se sabe que éstos últimos participan en el movimiento de las mitocondrias por el citoplasma, junto con proteínas motoras. A través de estudios y datos previos se ha relacionado a los filamentos intermedios de tipo III, y en concreto a la vimentina, con la dinámica mitocondrial, aunque apenas hay literatura al respecto.En el presente Trabajo de Fin de Máster se presenta una metodología empleada para tratar de elucidar si los filamentos intermedios son proteínas de localización mitocondrial. Si es así, sus genes podrían ser responsables de patologías neurodegenerativas que, hasta la fecha, tienen una etiología desconocida. A este efecto: 1) se evaluó la probabilidad que los diferentes filamentos intermedios presentan de entrar a mitocondria analizando su secuencia mediante programas bioinformáticos; 2) seguidamente se clonaron algunos filamentos intermedios que presentaban alta probabilidad de ser importados a mitocondria y se generaron constructos de fusión con proteínas reporteras como una oxidasa alternativa, o proteínas fluorescentes; 3) Por último, se generaron partículas lentivirales para inducir la expresión de las proteínas de fusión en células eucariotas en cultivo en monocapa y se inició el análisis de su posible efecto. La enzima oxidasa alternativa provee un método de selección metabólica en células carentes de DNA mitocondrial (denominadas ρ0), para determinar si la proteína cuya expresión se ha inducido en las células es capaz de entrar a la mitocondria. Los constructos con proteínas fluorescentes permitieron observar los filamentos intermedios mediante microscopía de fluorescencia y permitirán su análisis mediante videomicroscopía “in vivo” para evaluar si existe co-localización con la mitocondria. Máster en Biología Molecular y Celular El autor no autoriza la difusión del texto completo de su obra mitocondria citoesqueleto filamentos intermedios proteína fluorescente oxidasa alternativa cadena de transporte electrónico patología mitocondrial patología neurodegenerativa infección vector lentiviral plásmido Bayona Bafaluy, María Pilar dir. Fernández Silva, Patricio dir. Universidad de Zaragoza Bioquímica y Biología Molecular y Celular Bioquímica y Biología Molecular 622354@celes.unizar.es 3677570 http://zaguan.unizar.es/TAZ/CIEN/2012/8913/TAZ-TFM-2012-747.pdf Memoria (spa) TAZ TFM CIEN URI http://zaguan.unizar.es/record/8913 SUPPORTED 0 MD5 http://zaguan.unizar.es/TAZ/CIEN/2012/8913/TAZ-TFM-2012-747.md5 4096 image/x.djvu 6 http://djvu.sourceforge.net/abstract.html DJVU/6 Profile information Lizardtech Document Express Enterprise 5.1 2011-01-19T11:29:27 URI http://zaguan.unizar.es/TAZ/CIEN/2012/8913/TAZ-TFM-2012-747.pdf disk Minimum View Print Visualization of DJVU requires specific software, like DjVu Browser Plugin URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 license URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 You are free to adapt, copy, transmite or distribute the work under the following conditions: (1) You must attribute the work in the manner specified by the author or licensor (but not in any way that suggests that they endorse you or your use of the work). (2) You may not use this work for commercial purposes (3) For any reuse or distribution, you must make clear to others the license terms of this work (4) Any of the above conditions can be waived if you get permission from the copyright holder (5) Nothing in this license impairs or restricts the author's moral rights This object is licensed under Creative Common Attribution-NonCommercial 3.0 (further details: http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/). Universidad de Zaragoza Automatizacion de Bibliotecas Edif. Matematicas, Pedro Cerbuna 12, 50009 Zaragoza auto.buz@unizar.es