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2012-09-21

spa Martínez Abadía, Ignacio Schoorlemmer, Jon http://zaguan.unizar.es/record/9036 Las células madre embrionarias (ES) son células derivadas de la masa celular interna del blastocisto. Las dos características principales que definen a las células ES son la autorrenovación y la pluripotencia. Por autorrenovación entendemos la capacidad de las células de dividirse indefinidamente sin perder sus características, mientras que la pluripotencia hace referencia a la característica única de las células troncales embrionarias de poder dar lugar a cualquier tipo celular del organismo. Por estas características, representan un modelo biológico del desarrollo y una herramienta útil para el estudio de las células troncales en general. Rex1 (también conocido como Zfp42) codifica para una proteína de cuatro dedos de Zinc del tipo Cys-His en su extremo C-terminal. La presencia de la proteína REX1 es exclusiva de mamíferos placentarios y se asocia a la pluripotencia y la autorrenovación de las células ES humanas y de ratón. La sobreexpresión de la proteína REX1 afecta a autorrenovación de las células ES, como se ha comprobado en ensayos de formación de colonias en células transfectadas con plásmidos Rex1-IRES-PuroR. Mediante construcciones plasmídicas que dirigen la expresión de dominios estructurales de REX1 nos planteamos corroborar que en los resultados obtenidos en los ensayos de autorrenovación no reflejan interferencia de la expresión de Rex1 en la función de resistencia de la Puromicina en construcciones DNA-IRES-eGFP. Sin embargo, Los resultados obtenidos en este trabajo sugieren una interferencia de Rex1 sobre la expresión de la proteína eGFP en ensayos de transfección de células ES. La ausencia de Rex1 en células ES está relacionada con la pérdida de la pluripotencia y con un aumento en la expresión de elementos retrotransponibles (ERVs). Los ERVs son secuencias de ADN repetitivas que son componentes ubicuos y abundantes de la mayoría de los genomas de mamíferos en cuya regulación están implicados represores específicos como la demetilasa LSD1/KDM1A. La interacción proteica, demostrada en estudios in vitro, de REX1 y la proteína LSD1/KDM1A abre la posibilidad de una actuación conjunta en la regulación de los ERVs. En este trabajo, demostramos la interacción específica de las proteínas YY1 y YY2 con LSD1/KDM1A en ensayos in vitro con células 293T transfectadas. Además, concluímos que el dominio de la proteína necesario para la interacción de REX1 y LSD1 parece ser el dominio de los dedos de Zinc del extremo C-terminal. info:eu-repo/semantics/closedAccess Fulltext access not authorized info:eu-repo/semantics/bachelorThesis info:eu-repo/semantics/publishedVersion application/pdf 2012-09-05 02408nmm 2200000 a 4500 9036 TAZ-TFM-2012-784 spa Martínez Abadía, Ignacio Sobreexpresión de REX1 en células madre embrionarias de ratón Zaragoza Universidad de Zaragoza 2012 denied Las células madre embrionarias (ES) son células derivadas de la masa celular interna del blastocisto. Las dos características principales que definen a las células ES son la autorrenovación y la pluripotencia. Por autorrenovación entendemos la capacidad de las células de dividirse indefinidamente sin perder sus características, mientras que la pluripotencia hace referencia a la característica única de las células troncales embrionarias de poder dar lugar a cualquier tipo celular del organismo. Por estas características, representan un modelo biológico del desarrollo y una herramienta útil para el estudio de las células troncales en general. Rex1 (también conocido como Zfp42) codifica para una proteína de cuatro dedos de Zinc del tipo Cys-His en su extremo C-terminal. La presencia de la proteína REX1 es exclusiva de mamíferos placentarios y se asocia a la pluripotencia y la autorrenovación de las células ES humanas y de ratón. La sobreexpresión de la proteína REX1 afecta a autorrenovación de las células ES, como se ha comprobado en ensayos de formación de colonias en células transfectadas con plásmidos Rex1-IRES-PuroR. Mediante construcciones plasmídicas que dirigen la expresión de dominios estructurales de REX1 nos planteamos corroborar que en los resultados obtenidos en los ensayos de autorrenovación no reflejan interferencia de la expresión de Rex1 en la función de resistencia de la Puromicina en construcciones DNA-IRES-eGFP. Sin embargo, Los resultados obtenidos en este trabajo sugieren una interferencia de Rex1 sobre la expresión de la proteína eGFP en ensayos de transfección de células ES. La ausencia de Rex1 en células ES está relacionada con la pérdida de la pluripotencia y con un aumento en la expresión de elementos retrotransponibles (ERVs). Los ERVs son secuencias de ADN repetitivas que son componentes ubicuos y abundantes de la mayoría de los genomas de mamíferos en cuya regulación están implicados represores específicos como la demetilasa LSD1/KDM1A. La interacción proteica, demostrada en estudios in vitro, de REX1 y la proteína LSD1/KDM1A abre la posibilidad de una actuación conjunta en la regulación de los ERVs. En este trabajo, demostramos la interacción específica de las proteínas YY1 y YY2 con LSD1/KDM1A en ensayos in vitro con células 293T transfectadas. Además, concluímos que el dominio de la proteína necesario para la interacción de REX1 y LSD1 parece ser el dominio de los dedos de Zinc del extremo C-terminal. Máster en Iniciación a la Investigación en Ciencias Veterinarias El autor no autoriza la difusión del texto completo de su obra rex1 células embrionarias de ratón lsd1 Schoorlemmer, Jon dir. Universidad de Zaragoza Anatomía, Embriología y Genética Animal Genética 641918@celes.unizar.es 1109501 http://zaguan.unizar.es/TAZ/VET/2012/9036/TAZ-TFM-2012-784.pdf Memoria (spa) TAZ TFM VET URI http://zaguan.unizar.es/record/9036 SUPPORTED 0 MD5 http://zaguan.unizar.es/TAZ/VET/2012/9036/TAZ-TFM-2012-784.md5 4096 image/x.djvu 6 http://djvu.sourceforge.net/abstract.html DJVU/6 Profile information Lizardtech Document Express Enterprise 5.1 2011-01-19T11:29:27 URI http://zaguan.unizar.es/TAZ/VET/2012/9036/TAZ-TFM-2012-784.pdf disk Minimum View Print Visualization of DJVU requires specific software, like DjVu Browser Plugin URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 license URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 You are free to adapt, copy, transmite or distribute the work under the following conditions: (1) You must attribute the work in the manner specified by the author or licensor (but not in any way that suggests that they endorse you or your use of the work). 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