PUESTA EN MARCHA DE UN MODELO IN VITRO 3D DE EPITELIO INTESTINAL COMO BASE DE UN MODELO DE CÁNCER DE COLON EN CHIP

Díez Ballarin, Fernando
OCHOA GARRIDO, IGNACIO (dir.) ; Solanas Villacampa, Estela (dir.)

Universidad de Zaragoza, CIEN, 2021

Graduado en Biotecnología

Resumen: El cáncer de colon es un problema relevante para la salud pública, con una incidencia y una mortalidad elevada en todo el mundo. El desarrollo de nuevos modelos de estudio in vitro ha permitido superar importantes desventajas de modelos anteriores. Entre estos modelos se incluyen los modelos 3D de Organ-On-Chip. El objetivo del presente estudio fue recrear in vitro el epitelio de colon en un dispositivo microfluídico. En dicho modelo las células epiteliales se adhieren a una membrana porosa, que las separa a su vez de un canal inferior. El modelo será la base para el desarrollo posterior de un modelo Organ-On-Chip de cáncer de colon. Para ello se sembraron células Caco-2 o Caco-2:HT29-MTX (a un ratio 3:1, similar al ratio enterocitos:células caliciformes de colon) que se dejaron diferenciar durante 21 días. Sobre el modelo se valoró la diferenciación celular, la integridad del epitelio, la producción de moco y la evolución del epitelio en el tiempo. Se estableció una monocapa tanto con las células Caco-2 como Caco-2:HT29-MTX, que se mantuvo en cultivo durante 21 días. Las pruebas de azul alcián y de inmunofluorescencia para Muc-2 mostraron producción de mucina por las células HT29-MTX a 7 y 21 días, respectivamente. La permeabilidad del epitelio, mediante la técnica de Lucifer Yellow, similar a la observada en intestino y estudios previos, fue ligeramente mayor en las células Caco-2 con HT29-MTX, aunque no significativamente. Los resultados indican la formación de un epitelio similar al del colon, con una permeabilidad parecida y secreción de moco, si bien serán necesarios futuros estudios para una mejor caracterización.

Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado