| TAZ-TFG-2021-2934 |
Desarrollo de un método de screening (criba) para la detección rápida de aminas biógenas en alimentos mediante la generación de nanopartículas
Felices Manero, Carlos
Galbán Bernal, Francisco Javier (dir.)
Universidad de Zaragoza,
CIEN,
2021
Departamento de Química Analítica, Área de Química Analítica
Graduado en Química
Resumen: Con este trabajo se pretendió mejorar las prestaciones analíticas que ofrecía la reacción enzimática para la determinación de tiramina por medio de formación de nanopartículas de oro (AuNP). Para ello, se introdujo Pd (II) en la reacción, induciendo así la mejora de los resultados analíticos del método.
Se llevó a cabo el estudio de optimización de las condiciones de reacción, es decir, las concentraciones óptimas de cada uno de los reactivos que participaban (Pd (II), Au (III), TAO, disolución amortiguadora de fosfatos), así como a qué pH debía transcurrir la reacción enzimática. Obteniéndose como parámetros óptimos, [Au (III)]= 5,0x10-4 M; [Pd (II)]= 1,5x10-3 M; [TAO]= 0,125 U/mL; disolución amortiguadora de pH 7 y 0,3 M en fosfatos.
Se realizó un estudio de calibración con el fin de determinar la Tir (tiramina) presente en disolución. Obteniéndose un rango lineal de 5,0x10-5M hasta 2,5x10-4 M.
Se estudió el efecto de la His (histamina) como amina biógena interferente en la determinación de Tir. Se elaboraron una serie de procedimientos para eliminar esta amina y así poder evitar la interferencia aditiva en la señal que suponía a la determinación de Tir con nuestro método.
Se comprobó la presencia de paladio en las nanopartículas de oro vistas anteriormente, gracias a técnicas como Microscopía Electrónica de Transmisión-Barrido (STEM) con detector de Rayos-X EDX o Espectroscopía Fotoelectrónica de Rayos-X (XPS).
Por último, se realizaron una serie de estudios con el fin de conocer la función del Pd (II) dentro de la reacción. Dichos estudios nos permitieron comprobar el aumento de la señal y mejora de esta producidos por la presencia de Pd (II). Además, gracias a ellos pudimos ver el papel fundamental que tiene la enzima TAO en la formación y estabilización de las nanopartículas.
Se llevó a cabo el estudio de optimización de las condiciones de reacción, es decir, las concentraciones óptimas de cada uno de los reactivos que participaban (Pd (II), Au (III), TAO, disolución amortiguadora de fosfatos), así como a qué pH debía transcurrir la reacción enzimática. Obteniéndose como parámetros óptimos, [Au (III)]= 5,0x10-4 M; [Pd (II)]= 1,5x10-3 M; [TAO]= 0,125 U/mL; disolución amortiguadora de pH 7 y 0,3 M en fosfatos.
Se realizó un estudio de calibración con el fin de determinar la Tir (tiramina) presente en disolución. Obteniéndose un rango lineal de 5,0x10-5M hasta 2,5x10-4 M.
Se estudió el efecto de la His (histamina) como amina biógena interferente en la determinación de Tir. Se elaboraron una serie de procedimientos para eliminar esta amina y así poder evitar la interferencia aditiva en la señal que suponía a la determinación de Tir con nuestro método.
Se comprobó la presencia de paladio en las nanopartículas de oro vistas anteriormente, gracias a técnicas como Microscopía Electrónica de Transmisión-Barrido (STEM) con detector de Rayos-X EDX o Espectroscopía Fotoelectrónica de Rayos-X (XPS).
Por último, se realizaron una serie de estudios con el fin de conocer la función del Pd (II) dentro de la reacción. Dichos estudios nos permitieron comprobar el aumento de la señal y mejora de esta producidos por la presencia de Pd (II). Además, gracias a ellos pudimos ver el papel fundamental que tiene la enzima TAO en la formación y estabilización de las nanopartículas.
Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado
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