Generación enzimática de nanomateriales de cobre para la determinación de la tiramina como amina biógena modelo.

Pericás Albarova, Marta
de Marcos Ruiz, Susana (dir.)

Universidad de Zaragoza, CIEN, 2022
Departamento de Química Analítica, Área de Química Analítica

Graduado en Química

Resumen: Con este trabajo se pretende realizar el estudio y optimización de los parámetros de un método analítico basado en la reacción enzimática de formación de nanomateriales de cobre para la determinación de aminas biógenas usando la tiramina como amina biógena modelo.
En primer lugar, se realiza la validación del método con Au(III) y posteriormente, se procede al estudio de la reacción con Cu(II) mediante formación de nanopartículas (absorción) y nanoclusters (fluorescencia) realizando su caracterización por XPS y TEM.
Se realiza la optimización de las condiciones de reacción de formación de nanopartículas y nanoclusters de cobre: las concentraciones de Cu(II) y de la enzima TAO, la disolución amortiguadora, su concentración y el pH al que se lleva a cabo la reacción, la temperatura y el tiempo de adición de Cu(II).
A partir de estos resultados se realiza la calibración para la determinación de tiramina mediante la formación de nanopartículas (banda de absorción del plasmon) a 50ºC, sobre una disolución amortiguadora de MES a pH=6 y 0,1M, con una concentración de 0,25 U/mL de TAO y [Cu(II)]=0,25 mM. En esta calibración se obtiene una función sigmoidal que concuerda con el mecanismo de formación de las nanopartículas.
Para la determinación de tiramina mediante la formación de nanoclusters (fluorescencia), se prepara una calibración a 50ºC, sobre una disolución amortiguadora de MES a pH=6 y 0,1M, con una concentración de 1,5 U/mL de TAO y [Cu(II)]=0,05 mM.
Tras la calibración se obtienen parámetros analíticos, tales como límite de detección, límite de cuantificación y DER.
Finalmente, se estudia el efecto interferente de otras aminas biógenas similares al analito de estudio tales como cadaverina, histamina y putrescina.

Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado