125136 20230322092647.0 TAZ-TFG-2022-3353 spa Brú Albesa, Marcos Study of CatSper channel activation in ram spermatozoa Estudio de la activación del canal de calcio CatSper en espermatozoides ovinos Zaragoza Universidad de Zaragoza 2022 by-nc-sa Creative Commons 3.0 http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ El calcio es un catión que actúa como agente señalizador fundamental para que los espermatozoides adquieran capacidad fecundante, dado que participa en los procesos de capacitación, hiperactivación, quimiotaxis y reacción acrosómica. El canal más importante encargado de la entrada de calcio a los espermatozoides es CatSper, un canal específico de la célula espermática localizado en la membrana de la pieza intermedia del flagelo. Para que el calcio entre al espermatozoide a través de CatSper, éste tiene que activarse. En espermatozoides humanos está descrito que CatSper se activa por: 1) despolarización de la membrana plasmática por cambios de voltaje, 2) alcalinización del medio intracelular, y 3) unión a determinados ligandos, como la progesterona. <br />En este trabajo se planteó la hipótesis de que existen diferencias entre los mecanismos de activación del canal CatSper en espermatozoides ovinos y humanos. El objetivo de este trabajo fue, por tanto, estudiar si las formas de activación de CatSper en espermatozoides humanos producen también la activación de CatSper en espermatozoides ovinos. Además, se estudiaron los efectos de inhibidores conocidos de CatSper en humano, como ESI-09 y H-89, en espermatozoides ovinos.<br />Para ello, se realizaron los mismos experimentos en espermatozoides de ambas especies, previamente seleccionados por swim-up. Los cambios en la concentración de calcio intracelular y en el pH intracelular se evaluaron mediante fluorimetría con las sondas Fluo-4-AM y BCECF, respectivamente. <br />Los resultados mostraron que el H-89 no ejerce ningún efecto sobre CatSper en los espermatozoides ovinos y que, sorprendentemente, el ESI-09 favorece el incremento de [Ca2+]i en espermatozoides ovinos expuestos a altas concentraciones de calcio en el medio extracelular. De los tres mecanismos de activación de CatSper ensayados en espermatozoides ovinos, solo la activación por despolarización de la membrana plasmática en un medio con alta concentración de K+ y pH 8 produce un incremento del calcio intracelular.<br /><br /> Graduado en Biotecnología Derechos regulados por licencia Creative Commons Pérez Pé, Rosaura dir. Miguel Jiménez, Sara dir. Universidad de Zaragoza Bioquímica y Biología Molecular y Celular 780269@unizar.es 731152 http://zaguan.unizar.es/record/125136/files/TAZ-TFG-2022-3353.pdf Memoria (spa) oai:zaguan.unizar.es:125136 driver trabajos-fin-grado TAZ TFG CIEN 20220909141348.CREATION_DATE deposita:2023-03-21