spaMonte Serrano, JuanPereboom Maicas, Desirée Alda Torrubia, José Octavio Efecto de la metformina y resveratrol frente a la mortalidad, senescencia y sobreproducción de radicales libres inducidospor radiación UVB en queratinocitos y fibroblastos humanosTESIS-2024-124Introducción: La exposición diaria de las células de la piel a dosis subcitotóxicas de radiación ultravioleta es uno de los principales determinantes de senescencia celular y envejecimiento cutáneo secundario. La protección convencional actual frente a estas radiaciones se fundamenta en el uso de barreras externas. Conseguir efectos protectores adicionales a nivel celular incrementaría esta acción protectora.<br />Objetivos: Dado que la fotosenescencia es uno de los factores más importantes del envejecimiento cutáneo y que la metformina y el resveratrol son dos conocidos compuestos antisenescentes, hemos cuantificado los posibles efectos protectores de los mismos frente a la senescencia inducida por radiación ultravioleta.<br />Material y métodos: El modelo de nuestro estudio in vitro son queratinocitos de la línea HaCaT y fibroblastos humanos obtenidos por cultivo primario. Estas células han sido irradiadas con 1,8 J/cm2 de radiación UVB y se ha empleado la citometría de imagen para determinación simultánea de muerte y senescencia celular utilizando los fluorocromos DAPI, AnexinaV-PE y C12FDG en una técnica que hemos denominado APO5-Sen. Se ha irradiado a las células con 5,6 J/cm2 de radiación UVB para determinar la sobreproducción de anión superóxido mediante citometría de imagen y el fluorocromo HE. Se ha cuantificado el efecto de la radiación ultravioleta sobre las células y el posible beneficio del pretratamiento con metformina y/o resveratrol sobre estas células irradiadas.<br />Resultados: El tratamiento preventivo con metformina 5 ¿M protege frente a la muerte celular inducida por UVB tanto en queratinocitos (-23%) como en fibroblastos humanos (-14,5%). El tratamiento preventivo con resveratrol 25 ¿M, administrado antes de la exposición a UVB, protege frente la senescencia celular fotoinducida tanto en queratinocitos (-48,5%) como en fibroblastos humanos (-52%). Además, el resveratrol presentó propiedades senolíticas en células no irradiadas. El tratamiento preventivo combinado con metformina 5 ¿M y resveratrol 25 ¿M protege frente al incremento de anión superóxido inducido por UVB, tanto en queratinocitos (-27%) como en fibroblastos humanos (-53,6%). En fibroblastos humanos el efecto de esta combinación fue aditivo. En células no irradiadas, el tratamiento combinado con metformina 5 ¿M y resveratrol 25 ¿M mostró eficacia como barredor de radicales libres.<br />Conclusiones: Los resultados del presente trabajo validan la eficacia de la metformina y del resveratrol a la hora de ofrecer protección celular frente a la radiación ultravioleta. Serán necesarios nuevos estudios in vivo para conocer los posibles efectos fotoprotectores de la metformina y resveratrol administrados tópica y sistémicamente a bajas concentraciones.<br />Palabras Clave: metformina, resveratrol, muerte celular, senescencia celular, radicales libres, radiación UVB, queratinocitos, fibroblastos.<br /><br />Universidad de Zaragoza, Prensas de la Universidad2023http://zaguan.unizar.es/record/135014http://zaguan.unizar.es/record/135014oai:zaguan.unizar.es:135014