De La Osada García Jesús Martínez Beamonte Roberto 2024 Resumen<br />Los compuestos minoritarios triterpénicos bioactivos del aceite de oliva virgen extra, incluidos el dialcohol, eritrodiol, y el hidrocarburo escualeno, han mostrado efectos biológicos significativos en estudios con animales. Para una mejor caracterización de los cambios a nivel del transcriptoma hepático, ambos compuestos se han estudiado en diferentes modelos animales mediante secuenciación de ARN.<br />La administración a largo plazo de 10 mg/kg de eritrodiol en una dieta occidental purificada a ratones carentes de Apoe aumentó significativamente 68 genes y redujo 124 genes hepáticos con un nivel de cambio de 2 veces. Estos genes pertenecían a procesos de desintoxicación, metabolismo de proteínas y metabolitos relacionados con ácidos nucleicos. La confirmación mediante transcripción inversa y PCR cuantitativa en tiempo real mostró cambios significativos por eritrodiol. Cuando se analizaron algunos de ellos en ratones hembra deficientes en Apoe, no se observó ningún cambio. Asimismo, no se observaron variaciones significativas en ratones deficientes en Apoe que recibieron dosis que oscilaban entre 0,5 y 5 mg/kg de eritrodiol. Estos resultados demuestran que el eritrodiol desempeña un papel selectivo en la regulación de la expresión génica hepática, en función del sexo y de la dosis.<br />El efecto del escualeno se evaluó en dos grupos de conejos machos de Nueva Zelanda alimentados durante 4 semanas con una dieta suplementada con un 1% de aceite de girasol o con la misma dieta suplementada con un 0,5% de escualeno. La ontología génica del transcriptoma hepático alterado se clasificó en: transporte de proteínas y esteroles, metabolismo lipídico, lipogénesis, acciones antiinflamatorias y antineoplásicas. La confirmación mediante transcripción inversa y PCR cuantitativa en tiempo real mostró que los conejos que recibían escualeno presentaban una marcada expresión hepática de PNPLA3, GCK, TFCP2L1, ASCL1, ACSS2, OST4, FAM91A1, MYH6,<br />LRRC39, LOC108176846, GLT1D1 y TREH. El escualeno también se acumuló en los hígados, al igual que sus metabolitos de la cascada biosintética del colesterol, incluidos el lanosterol, el dihidrolanosterol, el lathosterol, el zymostenol y el desmosterol. El efecto<br />del lanosterol, el dihidrolanosterol, el zimostenol y el desmosterol, probado en la línea celular 12 de hígado de ratón (AML12), reprodujo el mismo patrón de expresión del hígado de conejo para Acss2, Fam91a1 y Pnpla3. En conjunto, los resultados sugieren que<br />el escualeno y sus metabolitos son moléculas clave para los cambios transcripcionales hepáticos necesarios para proteger la disfunción hepática.<br />El efecto del escualeno sobre el transcriptoma hepático también se comprobó en dos grupos de cerdos machos Large White x Landrace que desarrollaban esteatohepatitis no alcohólica al ser alimentados con una dieta esteatósica rica en grasa/colesterol/fructosa y pobre en metionina y colina, o con la misma dieta suplementada con un 0,5% de escualeno durante un mes. En los cerdos que recibieron la dieta con escualeno, PPP1R1B, OASL, PPP4R4, NEURL3, TMEM45B, AFP, ENPEP, LOC110256649, LOC100526118, SPRY3, SQLE y CHL1 se modularon significativamente. Estos cerdos también presentaban menores áreas de triglicéridos y gotas lipídicas hepáticas y un mayor ballooning celular. Se identificaron fuertes correlaciones entre estos parámetros y los transcritos modificados. Además, la expresión de PPP1R1B, TMEM45B, AFP y ENPEP siguió el mismo patrón in vitro utilizando líneas celulares de hepatoma humano (HEPG2) y de hígado de ratón 12 (AML12) incubadas con escualeno, lo que indica un efecto directo del escualeno sobre estas expresiones. En conjunto, estos datos indican que el escualeno es capaz de modular los cambios de expresión génica que pueden influir en la progresión de la esteatohepatitis no alcohólica.<br /> TESIS