000014832 001__ 14832
000014832 005__ 20170831220600.0
000014832 037__ $$aTAZ-TFM-2014-152
000014832 041__ $$aspa
000014832 1001_ $$aSainz de la Maza Arnal, Pilar
000014832 24500 $$aEstudio de la actividad de bombas de eflujo de Mycobacterium tuberculosis en un modelo de Escherichia coli
000014832 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza$$c2014
000014832 506__ $$aby-nc-sa$$bCreative Commons$$c3.0$$uhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/
000014832 520__ $$aLa tuberculosis,cuyo agente causal es Mycobacterium tuberculosis,continúa siendo una de las enfermedades infecciosas de mayor impacto social. Las bombas de eflujo son proteínas de membrana encargadas en el transporte de compuestos al exterior de la bacteria. En este proyecto, se pretendía llevar a cabo la caracterización en E. coli de las bombas Rv1258c (Tap), Rv1410c (P55) y Rv2942 (MmpL7) pertenecientes a M. tuberculosis e implicadas en la resistencia intrínseca a varios compuestos, con el objetivo de soslayar el lento crecimiento de las micobacterias y la complejidad de su envoltura bacteriana. Con las cepas generadas se llevaron a cabo ensayos de resistencia a diversos fármacos, estudios de acumulación de eflujo, así como la determinación del nivel de expresión y producción de las proteínas micobacterianas en la membrana de E. coli. Tras no observarse ningún tipo de diferencia significativa en los ensayos de susceptibilidad entre las cepas deleccionadas en sus propias bombas y las complementadas con las proteínas micobacterianas, se llevó a cabo la construcción del mutante oxyR en E. coli. La generación de esta cepa fue un nuevo intento de correlacionar nuestro modelo de estudio con M. tuberculosis, ya que este microorganismo es altamente sensible a la isoniazida, lo cual ha sido atribuido a lesiones en dicho gen. No obstante, al transformar el mutante knock-out de E. coli deleccionado en oxyR con las bombas micobacterianas no se observó complementación alguna. Los ensayos de PCR a tiempo real revelaron que las bombas Tap y P55 se estaban transcribiendo, sin embargo, no se puede afirmar que se estén sintetizando en la membrana ya que no fueron identificadas mediante ensayos de proteómica. En definitiva, es necesario seguir trabajando en el desarrollo de este modelo para asegurar que estas proteínas micobacterianas se están produciendo y que lo hacen de una manera funcional, ya que la pared bacteriana de M. tuberculosis es mucho más compleja e hidrofóbica que la de E. coli.
000014832 521__ $$aMáster Universitario en Biología Molecular y Celular
000014832 540__ $$aDerechos regulados por licencia Creative Commons
000014832 6531_ $$amycobacterium tuberculosis
000014832 6531_ $$atubercuolosis
000014832 6531_ $$abombas de eflujo
000014832 6531_ $$aoxyr
000014832 6531_ $$aisoniazida
000014832 6531_ $$atap
000014832 6531_ $$ap55
000014832 6531_ $$ammpl7
000014832 700__ $$aAínsa Claver, José Antonio$$edir.
000014832 700__ $$aDias Rodrigues, Liliana Isabel$$edir.
000014832 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$bBioquímica y Biología Molecular y Celular$$cBioquímica y Biología Molecular
000014832 8560_ $$f588976@celes.unizar.es
000014832 8564_ $$s1660022$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/14832/files/TAZ-TFM-2014-152.pdf$$yMemoria (spa)
000014832 909CO $$ooai:zaguan.unizar.es:14832$$pdriver$$ptrabajos-fin-master
000014832 950__ $$a
000014832 980__ $$aTAZ$$bTFM$$cCIEN