Resumen: Este trabajo tiene el objetivo de la calibración del eje 𝑍 para un microscopio de variación focal mediante esferas, para ello se va a obtener un coeficiente de calibración, 𝑐𝑧, el cual se aplicará a la medición que se realice para así obtener un resultado más aproximado a la realidad. La técnica con esferas permite calibrar un rango completo de alturas en lugar de puntos específicos como la calibración tradicional con bloques patrón. Sin embargo, esta técnica presenta retos adicionales como puede ser el ruido en la superficie de la esfera, o el sector angular medido. La calibración se realiza para un microscopio de variación focal llamado InfiniteFocusSL de la marca Alicona, ubicado en el laboratorio de metrología de la Escuela de Ingeniería y Arquitectura de la Universidad de Zaragoza. Mediante el software de MatLab, a partir de un algoritmo ya desarrollado, se han realizado diferentes ensayos sobre esferas virtuales, de manera que se analice la distribución de ruido aleatoria en la superficie de la esfera, así como la reducción del sector angular a la hora de estimar el radio. Además, se analiza el comportamiento para una cantidad elevada de esferas para validar los resultados obtenidos con menos debido a la carga de procesamiento limitada. Finalmente, se realiza el cálculo del coeficiente de calibración del equipo y su incertidumbre, a partir de las mediciones reales con el equipo.