Clonaje, expresión recombinante, purificación y evaluación de la actividad biológica del regulador de respuesta esencial CprR de Campylobacter jejuni

Gascón Murugarren, Jesús
González Rodríguez, Andrés (dir.) ; Casado Apastegui, Javier (dir.)

Universidad de Zaragoza, CIEN, 2024

Graduado en Biotecnología

Resumen: Campylobacter jejuni es el agente etiológico del 80-90% de las infecciones por bacterias del género Campylobacter (campilobacteriosis) en el ser humano, siendo considerado el principal patógeno zoonótico causante de gastroenteritis en países desarrollados. El uso inadecuado de antibióticos para el tratamiento de estas infecciones ha incrementado considerablemente los niveles de resistencia antimicrobiana en este patógeno y limitado la eficacia de las terapias antimicrobianas de primera línea empleadas en la actualidad. En consecuencia, la Organización Mundial de la Salud ha incluido a C. jejuni como patógeno bacteriano de prioridad alta en la búsqueda de nuevos agentes antimicrobianos. El regulador de respuesta CprR de C. jejuni constituye una potencial diana terapéutica para el desarrollo de nuevos antibióticos dado su carácter esencial para la viabilidad del microorganismo. Asimismo, se trata de una proteína poco conservada entre otros géneros bacterianos, lo que facilita el descubrimiento de antimicrobianos de acción específica o espectro reducido, limitando su efecto sobre la microbiota normal. En el presente Trabajo de Fin de Grado se ha llevado a cabo el clonaje, sobreexpresión y purificación de la proteína CprR recombinante, con un alto grado de pureza y actividad biológica. El regulador de respuesta CprR fue capaz de unirse de forma específica a promotores diana conocidos. La actividad de unión al DNA de CprR fue inhibida in vitro por compuestos de bajo peso molecular que al parecer actúan como ligandos inhibidores de la actividad del regulador. Los resultados obtenidos constituyen un importante punto de partida para la caracterización y validación de este regulador de respuesta esencial como diana terapéutica frente a C. jejuni.
Palabras clave: Campylobacter jejuni, resistencia antimicrobiana, diana terapéutica, regulador transcripcional, regulador de respuesta, CprR.

Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado