TAZ-TFG-2015-3106

Estudio de asociaciones nanopartículas de plata con medios biológicos mediante electroforesis en gel y detección por Ablación Láser-ICP-MS

Mora Sanz, Verónica
María Sierra Jiménez García-Alcalá (dir.)

Universidad de Zaragoza, CIEN, 2015
Departamento de Química Analítica, Área de Química Analítica

Graduado en Química

Resumen: Cuando las nanopartículas de plata (AgNPs) entran en contacto con un fluido biológico tienden a unirse a moléculas presentes en el medio, en concreto, al entrar en contacto con la sangre se unen a proteínas, formando proteínas corona (PC). En este trabajo se quiere estudiar cómo afecta la funcionalización de las AgNPs en su afinidad para adsorberse a proteínas mayoritarias del plasma sanguíneo. En el presente trabajo se han usado tres tipos de AgNPs con distintos recubrimientos: citratos, polivinilpirrolidona (PVP) y polietilenglicol (PEG). Las proteínas utilizadas han sido albúmina de suero bovino y transferrina humana por ser las más abundantes en el plasma sanguíneo. Se realizaron incubaciones de AgNPs con proteínas, a un pH de 7,4 que es al que se encuentra la sangre y a 37 ˚C para simular la temperatura a la que se encuentra el cuerpo humano. Para llevar a cabo el estudio se han usado distintas técnicas, en primer lugar se ha usado la espectrometría de absorción molecular ultravioleta - visible (EAM-UV-Vis) y la electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE) para evaluar cualitativamente si se formaban PC. Tras comprobar que sí se formaban PC, se llevo a cabo el método Bradford, también haciendo uso de la EAM-UV-Vis, para cuantificar el porcentaje de AgNPs que pasaban a formar parte de PC. También se realizaron electroforesis en gel de agarosa (AGE) y posteriormente las AgNPs y PC separadas en el gel se detectaron mediante ablación láser e ICP-MS. Por último se evaluó el porcentaje de Ag0 presente en las NPs que pasa a formar Ag (I) en presencia de las proteínas mediante espectrometría de masas con plasma de acoplamiento inductivo (ICP-MS).