TAZ-TFG-2016-4602


Maduración de ovocitos equinos por encapsulación

Aranda Cardona, Ana Lidia
Gil Huerta, Lydia (dir.) ; González Ortí, Noelia (dir.)

Universidad de Zaragoza, VET, 2016
Patología Animal department, Medicina y Cirugía Animal area

Graduado en Veterinaria

Abstract: Las técnicas de reproducción tienen un impacto positivo en la industria de la cría equina, por ejemplo la inseminación artificial o la manipulación de semen fresco y congelado, también la producción de embriones in vitro, más limitada sin embargo debido a los problemas en el desarrollo de la maduración y fertilización in vitro. Aquí es donde entra nuestro trabajo, ya que éste se basa en la maduración de ovocitos de yegua mediante la técnica de esferificación o encapsulación, de tal modo, que dicho método pueda ayudar a conseguir ovocitos maduros y aptos para ser fecundados con éxito. Estos ovocitos pueden obtenerse bien de yeguas vivas o como hemos hecho en este estudio, por extracción a partir de ovarios de matadero. Llegados los ovarios al laboratorio, se realiza la extracción de sus ovocitos y posterior selección. En nuestro caso sin embargo, dada la baja cantidad obtenida por la época del año, no se hizo ningún tipo de selección de los mismos. Obtenidos los ovocitos, se dividieron en dos grupos: el control, sometido al protocolo de maduración convencional, y el grupo que sería madurado mediante la técnica de encapsulación. Para ello, cada ovocito era colocado en una microgota de alginato (0,7% alginato en medio M199H), dicha microgota se tomaba con una micropipeta y se dejaba caer en una solución de entrecruzamiento (CaCl2, NaCl y agua Mili Q), donde permanecía 2 minutos. De aquí pasaban al medio de maduración, que sería el mismo que el de los ovocitos control: TCM199 suplementado con penicilina- estreptomicina, anfotericina, fluido folicular, LH y FSH. Fueron madurados por un periodo de 24 horas a 37ºC y 5% CO2. Para poder valorar su estado de maduración fueron sometidos a un protocolo de tinción de fluorescencia con Hoechst 3342. Los resultados obtenidos muestran que con el método de la encapsulación se obtiene más cantidad de ovocitos en metafase II y menos ovocitos degenerados.

Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado

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