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000064128 005__ 20171221155210.0
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000064128 1001_ $$aLozano Lalaguna, Rebeca
000064128 24200 $$aDevelopment of an enzymatic method of analysis for the determination of biogenic amines
000064128 24500 $$aDesarrollo de un método analítico enzimático para la determinación de aminas biogénicas
000064128 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza$$c2017
000064128 506__ $$aby-nc-sa$$bCreative Commons$$c3.0$$uhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/
000064128 520__ $$aEl objetivo principal de este trabajo es el desarrollo de un método óptico enzimático para determinar aminas biogénicas que posteriormente se pueda implementar en sensores o tiras reactivas. Se basa en la reacción de éstas con la enzima diaminooxidasa (DAO) generando H2O2 que a su vez reacciona con la enzima peroxidasa (HRP) produciendo cambios en las propiedades ópticas de la HRP, que permiten la determinación de las aminas. El método desarrollado es útil para determinar cadaverina, putrescina y histamina, si bien esta última en un orden de magnitud superior. En cuanto a las otras aminas, tiramina y triptamina regeneran a HRP impidiendo la posibilidad de su determinación y la reacción de DAO con feniletilamina es demasiado lenta para poder determinarla. Por otro lado, si la reacción de HRP con H2O2 se realiza en presencia de un colorante (ABTS) este cambia sus propiedades de absorción dando un producto coloreado azul que permite determinar las aminas. Se han optimizado las condiciones encontrando que la relación óptima de ABTS:HRP para obtener una señal estable es 40:1 y de ABTS:H2O2 es de 20:1, con una concentración de HRP 1.10-6 M y de DAO de 1,8 U/mL en cubeta. Si bien la histamina regenera las señales obtenidas y supone una interferencia se puede determinar cadaverina y putrescina en presencia de tiramina, triptamina, histamina y feniletilamina siempre que todas estas aminas se encuentren en la misma concentración que cadaverina y putrescina o inferior, en las condiciones establecidas. Finalmente se ha llevado a cabo la determinación de cadaverina y putrescina en una muestra real en que estén presentes el resto de aminas con un error del 8.6%.
000064128 521__ $$aGraduado en Química
000064128 540__ $$aDerechos regulados por licencia Creative Commons
000064128 700__ $$aSanz Vicente, María Isabel$$edir.
000064128 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$bQuímica Analítica$$cQuímica Analítica
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