000064133 001__ 64133 000064133 005__ 20171221155211.0 000064133 037__ $$aTAZ-TFG-2017-3093 000064133 041__ $$aspa 000064133 1001_ $$aNovo Huerta, Nerea 000064133 24200 $$aFunctional characterization of AIFM3 (Apoptosis inducing factor mitochondrion-associated 3) through the knock-out of its gene with the technique CRISPR-Cas9 and over-expression of the protein in bacteria and eukaryotic cells 000064133 24500 $$aCaracterización funcional de AIFM3 (Apoptosis-inducing factor mitochondrion-associated 3) mediante inactivación del gen por la técnica CRISPR-Cas9 y sobreexpresión de la proteína en bacterias y células eucariotas 000064133 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza$$c2017 000064133 500__ $$aAporta en secretaría material físico. Resumen y conclusiones disponibles también en inglés. 000064133 506__ $$aby-nc-sa$$bCreative Commons$$c3.0$$uhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ 000064133 520__ $$aEl factor inductor de apoptosis homólogo a AIF (AIFL) es un miembro de la familia de proteínas AIF (factor inductor de apoptosis) del que se posee escasa información tanto a nivel estructural como funcional. Con el objeto de estudiar la función de esta proteína se generó una línea celular humana KO para el gen que la codifica, aifm3, por medio de la técnica de edición genómica CRIPSR/Cas9. La expresión ubicua del factor sugiere una posible función esencial en la célula, que se vio sustentada por la observación de un crecimiento significativamente ralentizado en la línea celular silenciada. En paralelo, se estudió la hipotética función pro-apoptótica del factor, diseñando vectores de expresión tanto para células procariotas como eucariotas con el fin de sobreexpresar el gen aifm3 en Escherichia coli y en la línea celular humana HEK293T. La sobreexpresión en bacterias se demostró mediante Western Blot, mientras que no se observó expresión ni efectos significantes en las células humanas transfectadas. La optimización de la expresión en bacterias permitirá, en estudios posteriores, diseñar un protocolo de purificación para su caracterización tanto bioquímica (mediante ensayos cinéticos) como estructural (por técnicas de cristalización). 000064133 521__ $$aGraduado en Biotecnología 000064133 540__ $$aDerechos regulados por licencia Creative Commons 000064133 700__ $$aCarrodeguas Villar, José Alberto$$edir. 000064133 700__ $$aMedina Trullenque, María Milagros$$edir. 000064133 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$bBioquímica y Biología Molecular y Celular$$cBiología Celular 000064133 8560_ $$f682538@celes.unizar.es 000064133 8564_ $$s1290103$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/64133/files/TAZ-TFG-2017-3093.pdf$$yMemoria (spa) 000064133 8564_ $$s15233268$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/64133/files/TAZ-TFG-2017-3093_ANE.pdf$$yAnexos (spa) 000064133 909CO $$ooai:zaguan.unizar.es:64133$$pdriver$$ptrabajos-fin-grado 000064133 950__ $$a 000064133 951__ $$adeposita:2017-12-21 000064133 980__ $$aTAZ$$bTFG$$cCIEN