000077878 001__ 77878 000077878 005__ 20190226114811.0 000077878 037__ $$aTAZ-TFG-2018-2084 000077878 041__ $$aspa 000077878 1001_ $$aRoy Guerra, María 000077878 24200 $$aOptimization of acid Beta-Glucosidase enzyme activity measurement in dried blood spot and comparison with that in leukocytes in patients affected from Gaucher disease 000077878 24500 $$aOptimización de la determinación de la actividad de la enzima Beta-Glucosidasa ácida en gota de sangre seca y su comparación con la actividad de la misma en extracto de leucocitos en pacientes con enfermedad de Gaucher 000077878 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza$$c2018 000077878 500__ $$aEntrega en secretaría de la memoria física. 000077878 506__ $$aby-nc-sa$$bCreative Commons$$c3.0$$uhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ 000077878 520__ $$aLa enfermedad de Gaucher (EG) es un error innato del metabolismo lisosomal caracterizado por el depósito de glucosilceramida en este orgánulo y que se corresponde con una actividad reducida-nula de la enzima β-glucosidasa ácida (GC). El acúmulo de glucosilceramida en las células del sistema fagocítigo mononuclear es el principal responsable de los signos y síntomas propios de la enfermedad. Con el presente trabajo se persigue la optimización y validación de un método de detección de potenciales afectos de EG partir de muestras de gota de sangre seca (GSS). Para ello, se estudió el efecto de las siguientes variables sobre la actividad enzimática: composición del tampón de elución, cantidad de muestra a ensayar, tiempo de incubación y sensibilidad del sistema de detección fluorimétrico. A continuación, se ensayaron, siguiendo el procedimiento optimizado, 85 muestras, distribuidas en 18 afectos de EG, 22 portadores y 45 controles. Mediante una curva característica operativa del receptor (COR) se determinó un 95% de sensibilidad y 100% de especificidad para el método, así como un valor de corte de 2,06 μmol/L sangre/h, por encima del cual los individuos se consideran potencialmente no compatibles con la EG. Finalmente, se ensayó la actividad GC en extracto leucocitario, lo que permitió comprobar que existía una buena correlación entre ambos métodos (ρ=0,72), aportando fiabilidad al nuevo procedimiento. No obstante, al tratarse de un método de cribado, las muestras que no alcancen el valor de corte establecido deberán ser sometidas a un diagnóstico confirmatorio mediante el análisis de la actividad enzimática en extracto leucocitario. 000077878 521__ $$aGraduado en Biotecnología 000077878 540__ $$aDerechos regulados por licencia Creative Commons 000077878 700__ $$aIrún Irún, María Pilar$$edir. 000077878 700__ $$aCebolla Sanz, Jorge Javier$$edir. 000077878 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$bBioquímica y Biología Molecular y Celular$$c 000077878 7202_ $$aSevilla Miguel, Emma$$eponente 000077878 8560_ $$f702795@celes.unizar.es 000077878 8564_ $$s1069340$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/77878/files/TAZ-TFG-2018-2084.pdf$$yMemoria (spa) 000077878 8564_ $$s115993$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/77878/files/TAZ-TFG-2018-2084_ANE.pdf$$yAnexos (spa) 000077878 909CO $$ooai:zaguan.unizar.es:77878$$pdriver$$ptrabajos-fin-grado 000077878 950__ $$a 000077878 951__ $$adeposita:2019-02-26 000077878 980__ $$aTAZ$$bTFG$$cCIEN 000077878 999__ $$a20180626180657.CREATION_DATE