000087237 001__ 87237 000087237 005__ 20200120113920.0 000087237 037__ $$aTAZ-TFG-2019-4780 000087237 041__ $$aspa 000087237 1001_ $$aStoian, Andrei Mihai 000087237 24200 $$aTransfection methods in ApoE K.O. mice peritoneal macrophages 000087237 24500 $$aMétodos de transfección en macrófagos peritoneales de ratones ApoE K.O. 000087237 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza$$c2019 000087237 506__ $$aby-nc-sa$$bCreative Commons$$c3.0$$uhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ 000087237 520__ $$aEste estudio pretende lograr la expresión transitoria de genes en macrófagos peritoneales de ratones knockout para la apoliproteína E (ApoE –) bajo la regulación de un promotor especifico de macrófagos. Para ello se clonó en un plásmido la región promotora del gen Cd68 murino, que codifica una glicoproteína específica de monocitos y macrófagos; seguido del gen Pon3 murino, que codifica una proteína con actividad lactonasa y función antioxidante; y el gen reportero luc de la luciérnaga oriental, que codifica la proteína luciferasa.<br />El clonaje de la región promotora se abordó siguiendo dos estrategias distintas: una basada en la recombinación de secuencias homólogas y otra basada en la ligación de secuencias con extremos compatibles. Posteriormente se realizó la transfección de macrófagos peritoneales con el plásmido pCd68.Pon3.luc utilizando diferentes reactivos basados en dos métodos: transfección mediante liposomas o lipofección y transfección dirigida al núcleo mediante un campo eléctrico o electroporación.<br />La sobreexpresión del plásmido se comprobó mediante medición de la actividad luciferasa, fosfatasa alcalina y proteína verde fluorescente.<br /><br /> 000087237 521__ $$aGraduado en Biotecnología 000087237 540__ $$aDerechos regulados por licencia Creative Commons 000087237 700__ $$aNavarro Ferrando, María Ángeles $$edir. 000087237 700__ $$aHerrera Marcos, Luis Vicente$$edir. 000087237 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$bBioquímica y Biología Molecular y Celular$$cBioquímica y Biología Molecular 000087237 8560_ $$f720836@celes.unizar.es 000087237 8564_ $$s2305744$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/87237/files/TAZ-TFG-2019-4780.pdf$$yMemoria (spa) 000087237 909CO $$ooai:zaguan.unizar.es:87237$$pdriver$$ptrabajos-fin-grado 000087237 950__ $$a 000087237 951__ $$adeposita:2020-01-20 000087237 980__ $$aTAZ$$bTFG$$cCIEN 000087237 999__ $$a20191127130107.CREATION_DATE