Página principal > Quantification of mitochondrial DNA in human whole blood using real- time quantitative PCR > premis
Universidad de Zaragoza Custodiado por la Biblioteca de la Universidad de Zaragoza Premis-plugin for CDSInvenio, developed by Miguel Martín Miguel Martín González
oai:zaguan.unizar.es:9055 2017-08-31
eng Ledesma Fuentes, Marta Moreno Loshuertos, Raquel Fernández Silva, Patricio Laclaustra Gimeno, Martín Quantification of mitochondrial DNA in human whole blood using real- time quantitative PCR https://zaguan.unizar.es/record/9055/files/TAZ-TFM-2012-792.pdf Las variaciones en el contenido de mtDNA se han asociado con diferentes situaciones patológicas. Su determinación en sangre es un parámetro de interés pero se ve afectado por numerosas variables. El objetivo del presente proyecto es analizar la influencia de estas variables de cara a establecer un protocolo eficiente y reproducible. La PCR a tiempo real es una técnica que se está aplicando ampliamente en las ciencias biomédicas para la cuantificación de DNA tanto mitocondrial como genómico. En este estudio trabajamos con sangre total para cuantificar el DNA mitocondrial, calculado como el ratio DNA mitocondrial/DNA nuclear. Hemos iniciado el estudio de diferentes variables que pueden afectar a dicha cuantificación. Así, se ha comprobado que la concentración de plaquetas, orgánulos que contienen DNA mitocondrial pero no DNA nuclear, afecta de forma significativa en la determinación final. De igual modo hemos estudiado la influencia que produce en la cuantificación el método de extracción utilizado para obtener el DNA y la variabilidad inter-día e intra-día en el método de extracción. Se han encontrado diferencias significativas en todas estas variables. Para realizar estos análisis hemos creado un plásmido fruto de la fusión de nuestros genes de estudio (mitocondrial y nuclear) con el fin de realizar una calibración de las medidas mediante una recta de calibrado realizada con diluciones seriadas de este estándar. También hemos estudiado la influencia de la conformación del material genético en la eficacia de la reacción de PCR y se ha visto que, puesto que al digerir el DNA mitocondrial con una enzima la cuantificación de DNA mitocondrial se ve aumentada. En la continuación del proyecto queremos seguir clarificando las fuentes de variabilidad que afectan a la técnica de PCR a tiempo real en la cuantificación de DNA mitocondrial. 2014-11-27 9055 20170831220417.0 TAZ-TFM-2012-792 eng Ledesma Fuentes, Marta Quantification of mitochondrial DNA in human whole blood using real- time quantitative PCR Zaragoza Universidad de Zaragoza 2012 by-nc-sa Creative Commons 3.0 http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ Las variaciones en el contenido de mtDNA se han asociado con diferentes situaciones patológicas. Su determinación en sangre es un parámetro de interés pero se ve afectado por numerosas variables. El objetivo del presente proyecto es analizar la influencia de estas variables de cara a establecer un protocolo eficiente y reproducible. La PCR a tiempo real es una técnica que se está aplicando ampliamente en las ciencias biomédicas para la cuantificación de DNA tanto mitocondrial como genómico. En este estudio trabajamos con sangre total para cuantificar el DNA mitocondrial, calculado como el ratio DNA mitocondrial/DNA nuclear. Hemos iniciado el estudio de diferentes variables que pueden afectar a dicha cuantificación. Así, se ha comprobado que la concentración de plaquetas, orgánulos que contienen DNA mitocondrial pero no DNA nuclear, afecta de forma significativa en la determinación final. De igual modo hemos estudiado la influencia que produce en la cuantificación el método de extracción utilizado para obtener el DNA y la variabilidad inter-día e intra-día en el método de extracción. Se han encontrado diferencias significativas en todas estas variables. Para realizar estos análisis hemos creado un plásmido fruto de la fusión de nuestros genes de estudio (mitocondrial y nuclear) con el fin de realizar una calibración de las medidas mediante una recta de calibrado realizada con diluciones seriadas de este estándar. También hemos estudiado la influencia de la conformación del material genético en la eficacia de la reacción de PCR y se ha visto que, puesto que al digerir el DNA mitocondrial con una enzima la cuantificación de DNA mitocondrial se ve aumentada. En la continuación del proyecto queremos seguir clarificando las fuentes de variabilidad que afectan a la técnica de PCR a tiempo real en la cuantificación de DNA mitocondrial. Máster Universitario en Biología Molecular y Celular Derechos regulados por licencia Creative Commons mtDNA rt-PCR platelets variability Moreno Loshuertos, Raquel dir. Fernández Silva, Patricio dir. Laclaustra Gimeno, Martín dir. Universidad de Zaragoza Bioquímica y Biología Molecular y Celular Bioquímica y Biología Molecular 432055@celes.unizar.es 1999867 https://zaguan.unizar.es/record/9055/files/TAZ-TFM-2012-792.pdf Memoria (eng) Memoria (eng) oai:zaguan.unizar.es:9055 trabajos-fin-master driver TAZ TFM CIEN URI https://zaguan.unizar.es/record/9055 SUPPORTED 0 MD5 https://zaguan.unizar.es/record/9055/files/TAZ-TFM-2012-792.md5 0 image/x.djvu 6 http://djvu.sourceforge.net/abstract.html DJVU/6 Profile information Lizardtech Document Express Enterprise 5.1 0 URI https://zaguan.unizar.es/record/9055/files/TAZ-TFM-2012-792.pdf disk Minimum View Print Visualization of DJVU requires specific software, like DjVu Browser Plugin URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 license URI http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 You are free to adapt, copy, transmite or distribute the work under the following conditions: (1) You must attribute the work in the manner specified by the author or licensor (but not in any way that suggests that they endorse you or your use of the work). (2) You may not use this work for commercial purposes (3) For any reuse or distribution, you must make clear to others the license terms of this work (4) Any of the above conditions can be waived if you get permission from the copyright holder (5) Nothing in this license impairs or restricts the author's moral rights This object is licensed under Creative Common Attribution-NonCommercial 3.0 (further details: http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/). Universidad de Zaragoza Automatizacion de Bibliotecas Edif. Matematicas, Pedro Cerbuna 12, 50009 Zaragoza auto.buz@unizar.es