99438 20210520140815.0 TESIS-2021-063 spa 61 Santiago García, Llipsy Relevancia de la inflamación mediada por la granzima A en autoinmunidad y cáncer Zaragoza Universidad de Zaragoza, Prensas de la Universidad 2020 286 Tesis de la Universidad de Zaragoza 2254-7606 2021-63 Presentado: 11 09 2020 Tesis-Univ. Zaragoza, Microbiología, Medicina Preventiva y Salud Pública, 2020 Zaragoza, Universidad de Zaragoza 2020 La inflamación es un mecanismo clave que regula la actividad del sistema inmunitario en situaciones fisiológicas, por ejemplo, durante la eliminación de tumores y agentes patógenos. Sin embargo, la inflamación también es la responsable de respuestas fisiopatológicas durante las enfermedades infecciosas o autoinmunes y en la génesis y progresión del cáncer. Las células citotóxicas (células NK y linfocitos T citotóxicos) son esenciales para la defensa del huésped contra patógenos y tumores, sin embargo, también pueden estar implicadas en el daño asociado a inflamación crónica a través de la producción de citoquinas proinflamatorias o de la regulación de su producción por otros grupos celulares. Uno de los mecanismos que utilizan estas células para ejercer sus efectos citotóxicos es la exocitosis granular. Este es un proceso de interacción funcional entre la Perf (proteína formadora de poros) y las granzimas (Gzms), una familia de proteasas de serina, contenidas dentro de los gránulos citoplasmáticos de las células citotóxicas. Las granzimas A y B son las Gzms más abundantes y mejor estudiadas. Tradicionalmente, se ha pensado que las Gzms ejercen sus efectos biológicos eliminando las células afectadas. En la actualidad, ha quedado bien esclarecido que la GzmB es eminentemente citotóxica. Recientemente, varios grupos de investigación, incluido el nuestro, han destacado la capacidad de la GzmA para actuar como un mediador proinflamatorio. El objetivo general de esta tesis ha sido establecer la relevancia biológica de la inflamación inducida por la GzmA in vivo, durante la artritis reumatoide (AR) inducida con colágeno o el cáncer colorrectal de origen inflamatorio (CAC) inducido con DSS/AOM, así como, estudiar el mecanismo implicado en cada patología. Los resultados de este trabajo han permitido constatar que la deficiencia de GzmA atenúa la severidad de la artritis inducida por colágeno, lo que se acompaña de una menor producción de citoquinas proinflamatorias, en suero y en cultivo de ganglios linfáticos. Durante el estudio constamos que, al igual que lo que ocurre en humanos, los niveles de GzmA se incrementan en el suero y en las articulaciones de ratones con AR. Además que, la generación de la respuesta de células B frente al colágeno disminuye en ausencia de GzmA. Sin embargo, la protección observada en ausencia de GzmA no se debe a la generación de menos células T autorreactivas. Por otro lado, hemos comprobado que, la GzmA induce la formación y maduración de OCs desde sus precursores a través de un mecanismo dependiente de TNF. Con respecto a la implicación de la GzmA en el CAC se constató que, en ausencia de GzmA disminuyó la severidad del CAC inducido por DSS/AOM. Por otro lado, la disminución de la severidad en los ratones deficientes en GzmA se acompañó de una menor producción de citoquinas proinflamatorias a nivel intestinal. Durante la ausencia de GzmA disminuyó la incidencia tumoral, el número de tumores por ratón y el tamaño de los tumores desarrollados. Además, la GzmA reguló la transición de un epitelio sano a carcinoma, estando implicada en la transición epitelio-mesénquima y la proliferación celular. En cuanto al mecanismo implicado, se demostró que la GzmA activa inducía la producción de IL-6 y TNF en macrófagos de fenotipo M1 por un mecanismo dependiente de NF-kB. Posteriormente, la producción de IL-6 inducida por GzmA en macrófagos M1, promovía la activación de STAT3 en células de CCR. Finalmente, hemos demostrado que la inhibición de GzmA extracelular por Serpinab6b reduce los niveles de las citoquinas proinflamatorias IL-6 y TNF y el número e incidencia de tumores. Otro resultado relevante de este trabajo es que se demostró que existe correlación significativa entre la expresión de mRNA de GZMA y la inflamación en muestras de CCR humano. by-nc-nd Creative Commons 3.0 http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/es 7073 Programa de Doctorado en Bioquímica y Biología Molecular carcinogenesis oncologia inmunologia reumatologia Pardo Jimeno, Julian dir. Universidad de Zaragoza Microbiología, Medicina Preventiva y Salud Pública 485 tdr@unizar.es http://zaguan.unizar.es/record/99438/files/TESIS-2021-063.pdf Texto completo (spa) 10420689 oai:zaguan.unizar.es:99438 driver tesis Microbiología, Medicina Preventiva y Salud Pública TESIS