| TAZ-TFG-2021-2625 |
Transcriptómica de la esteatosis hepática no alcohólica inducida en cerdos a través de la dieta
Macías Herranz, Manuel
De la Osada García, Jesús (dir.) ; Martínez Beamonte, Roberto (dir.)
Universidad de Zaragoza,
FCSHUES,
2021
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Celular, Área de Bioquímica y Biología Molecular
Graduado en Nutrición Humana y Dietética
Resumen: Este Trabajo Final de Grado parte de las muestras de un estudio que se realizó utilizando cerdos a los que se les alimentó con una dieta enriquecida en grasa saturada, colesterol, fructosa y ácido cólico. A los 2 meses de la intervención dietética desarrollaron hígado graso. Se han analizado los RNAs hepáticos antes de la intervención y a los 2 meses de esta para ver qué cambios a nivel del transcriptoma están implicados en el desarrollo de la NAFLD en este modelo animal análogo al humano.
Se han procesado las muestras para extraer su RNA, estos sirvieron para para analizar los transcriptomas mediante RNAseq. Los resultados de los 3 pooles de muestras, fueron analizados para ver el patrón de genes implicados. Aquellos genes con cambios de expresión más relevantes se confirmaron individualmente por RT-qPCR y se analizaron sus expresiones antes y después de la intervención dietética, para ver las diferencias debidas a la acumulación de grasa en el hígado (esteatosis hepática). Se estudió mediante inmunohistoquímica la cantidad de la proteína inflamatoria CD68 en las muestras de inicio o control y en las muestras de tratamiento o esteatosis. Se analizaron una serie de parámetros bioquímicos séricos implicados en el desarrollo de esta patología.
Los animales desarrollaron NAFLD en tras 2 meses de intervención dietética confirmándose con la histología hepática. Además, se confirmó inflamación mediante la detección inmunohistoquímica de la proteína CD68 propia de los macrófagos. Los genes MT1D, GPNMB, SQLE, ENTPPL, LOC100520753, LOC102166944, MOXD1, NANOS1, PEPB4, SLC51B y LGAL S3 mostraron cambios estadísticamente significativos tras la intervención dietética tanto en el RNAseq como en la RTqPCR. Los cuerpos cetónicos junto con la fosfatasa alcalina podrían convertirse en posibles nuevos biomarcadores para el diagnóstico precoz de esta enfermedad metabólica.
Se han procesado las muestras para extraer su RNA, estos sirvieron para para analizar los transcriptomas mediante RNAseq. Los resultados de los 3 pooles de muestras, fueron analizados para ver el patrón de genes implicados. Aquellos genes con cambios de expresión más relevantes se confirmaron individualmente por RT-qPCR y se analizaron sus expresiones antes y después de la intervención dietética, para ver las diferencias debidas a la acumulación de grasa en el hígado (esteatosis hepática). Se estudió mediante inmunohistoquímica la cantidad de la proteína inflamatoria CD68 en las muestras de inicio o control y en las muestras de tratamiento o esteatosis. Se analizaron una serie de parámetros bioquímicos séricos implicados en el desarrollo de esta patología.
Los animales desarrollaron NAFLD en tras 2 meses de intervención dietética confirmándose con la histología hepática. Además, se confirmó inflamación mediante la detección inmunohistoquímica de la proteína CD68 propia de los macrófagos. Los genes MT1D, GPNMB, SQLE, ENTPPL, LOC100520753, LOC102166944, MOXD1, NANOS1, PEPB4, SLC51B y LGAL S3 mostraron cambios estadísticamente significativos tras la intervención dietética tanto en el RNAseq como en la RTqPCR. Los cuerpos cetónicos junto con la fosfatasa alcalina podrían convertirse en posibles nuevos biomarcadores para el diagnóstico precoz de esta enfermedad metabólica.
Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado
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