Establecimiento de un modelo de co-cultivo de esferoides de células tumorales de colon con bacterias características de la microbiota intestinal

Artal Herbella, María del Puerto
Solanas Villacampa, Estela (dir.) ; Ochoa Garrido, Ignacio (dir.)

Universidad de Zaragoza, CIEN, 2021
Departamento de Anatomía e Histología Humanas,

Graduado en Biotecnología

Resumen: La microbiota intestinal juega un papel fundamental en la homeostasis y su alteración está relacionada con patologías como el cáncer colorrectal. Esta relación puede ser estudiada a través de modelos in vitro 3D, como los esferoides. Su fácil producción y las características propias (morfología, “core” necrótico…) los convierten en una herramienta experimental impor-tante en el estudio del microambiente tumoral.
Con este trabajo se busca establecer un modelo sencillo para el estudio de la influencia de la flora intestinal sobre el cáncer colorrectal, a través de la formación de esferoides con líneas celulares propias de colon (esferoides con HCT-116 vs esferoides de HCT116 y HT29-MTX en proporción 3:1) y su co-cultivo con una cepa de Escherichia coli. Un modelo en el que apa-recen tanto células tumorales del epitelio intestinal (HCT-116), como una línea productora de mucina que representa a las células caliciformes de la mucosa (HT29-MTX). Ambas líneas celulares son esenciales para reproducir el epitelio intestinal a nivel de colon, donde las célu-las caliciformes se encuentran en mayor proporción y la mucina juega un papel importante en el establecimiento de la microbiota intestinal y por tanto para reproducir la relación microbiota-tumor. El modelo desarrollado servirá de base para futuros modelos más complejos, incluyen-do otras cepas bacterianas o incluso muestras de microbiota del paciente.
Los resultados muestran que la adición de células HT29MTX no afecta ni el tamaño ni la via-bilidad de los esferoides al compararlos con aquellos con únicamente células HCT116. Aun-que no se pudo constatar la producción de moco en los esferoides con HT29MTX, se observó una menor adhesión de E. coli a estos. El co-cultivo de esferoides de HCT116-HT29-MTX (3:1) y bacterias propias de la microbiota intestinal (E. coli) representa un prometedor modelo de la relación microbiota-tumor, si bien se necesita de una mayor profundización en el estudio.

Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado