| TAZ-TFG-2021-3053 |
Desarrollo de tiras reactivas para la determinación de aminas biógenas basadas en la generación enzimática de nanopartículas de oro
Alcubierre Simón, Sonia
de Marcos Ruiz, Susana (dir.)
Universidad de Zaragoza,
CIEN,
2021
Departamento de Química Analítica, Área de Química Analítica
Graduado en Química
Resumen: El objetivo de este trabajo es el desarrollo de un método óptico enzimático para la determinación rápida de tiramina a través de tiras. Se basa en la reacción enzimática de la tiramina con Tiramina oxidasa (TAO), en presencia de Au (III), dando lugar a la formación de nanopartículas de oro (AuNPs), que presentan una señal característica de plasmón a 560 nm y puede relacionarse directamente con la concentración de tiramina.
Para la puesta a punto del método se han optimizado tanto el soporte sólido de las tiras reactivas como las condiciones de inmovilización de los reactivos y la forma de medida.
Se ha comprobado que los mejores resultados se obtienen con soportes de celulosa al 5% y Au (III) 1 mM, [TAO] 20 U/mL y StabilCoat al 1%, a temperatura ambiente y midiendo al minuto 85. La cuantificación se lleva a cabo con una aplicación móvil, obteniendo las coordenadas RGB. En las condiciones óptimas, se ha obtenido un intervalo de respuesta línea de 3,58x10-3 hasta 2,5x10-2 M y LOD de 1,07 x10-3 M. Utilizando como parámetro analítico el cociente RM/R0 donde RM es el valor de la coordenada para cada muestra y R0 el valor del blanco.
Se estudia el método en muestras reales, utilizando vino y queso dopado, dando resultados positivos en este último. Se ha comparado mediante un test t que no existen diferencias significativas entre la concentración obtenida y el valor real, por lo que es un método adecuado para la determinación de este tipo de muestras.
Por último, se ha estudiado el efecto de la adición de otro metal (Pt (II)) en la formación de las nanopartículas, optimizando los distintos parámetros. Se observa una disminución del tiempo de medida, pero en este caso la señal no es cuantitativa.
Para la puesta a punto del método se han optimizado tanto el soporte sólido de las tiras reactivas como las condiciones de inmovilización de los reactivos y la forma de medida.
Se ha comprobado que los mejores resultados se obtienen con soportes de celulosa al 5% y Au (III) 1 mM, [TAO] 20 U/mL y StabilCoat al 1%, a temperatura ambiente y midiendo al minuto 85. La cuantificación se lleva a cabo con una aplicación móvil, obteniendo las coordenadas RGB. En las condiciones óptimas, se ha obtenido un intervalo de respuesta línea de 3,58x10-3 hasta 2,5x10-2 M y LOD de 1,07 x10-3 M. Utilizando como parámetro analítico el cociente RM/R0 donde RM es el valor de la coordenada para cada muestra y R0 el valor del blanco.
Se estudia el método en muestras reales, utilizando vino y queso dopado, dando resultados positivos en este último. Se ha comparado mediante un test t que no existen diferencias significativas entre la concentración obtenida y el valor real, por lo que es un método adecuado para la determinación de este tipo de muestras.
Por último, se ha estudiado el efecto de la adición de otro metal (Pt (II)) en la formación de las nanopartículas, optimizando los distintos parámetros. Se observa una disminución del tiempo de medida, pero en este caso la señal no es cuantitativa.
Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado
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