| TAZ-TFM-2020-794 |
Rentabilidad diagnóstica de la determinación automatizada de Anticuerpos Antinucleares (ANA) y sus patrones de Inmunofluorescencia (IFI) sobre células Hep- 2 en pacientes con sospecha de Conectivopatía. Estudio comparativo respecto a las técnicas tradicionales.
Esteban Cabello, Elena Isabel
Velilla Marco, José (dir.)
Universidad de Zaragoza,
MED,
2020
Departamento de Medicina, Psiquiatría y Dermatología, Área de Medicina
Máster Universitario en Iniciación a la Investigación en Medicina
Resumen: Introducción: Los Anticuerpos Antinucleares (ANAs) son inmunoglobulinas que reconocen componentes celulares autólogos; su determinación mediante Inmunfluorescencia indirecta (IFI) en células HEp-2 se utiliza como prueba de screening para el diagnóstico de las Conectivopatías. Esta técnica permite de forma visual evaluar los ANAs en base a su positividad, al título y a su patrón morfológico. En los últimos años se ha propuesto una taxonomía de clasificación ordenada para armonizar los nombres y las descripciones de los distintos patrones. Además, se ha intentado estandarizar las distintas técnicas de laboratorio para evitar el factor de subjetividad creando instrumentos de automatización para el procesamiento de los ANA-IFI mediante plataformas de reconocimiento basados en hardware y software sobre células HEp-2.
Objetivos: Nuestro objetivo principal fue compara la utilidad en la práctica clínica de la determinación automatizada en pacientes con sospecha de Conectivopatía frente a una técnica convencional.
Material y métodos: Estudio descriptivo, retrospectivo y observacional sobre muestras sanguíneas de pacientes con sospecha de Conectivopatía que acudieron a consultas del Hospital Universitario Miguel Servet. Se analizó el reconocimiento de patrones ANAs mediante IFI sobre células HEp-2 de forma covencional (visual) y automatizada en dos laboratorios diferentes. Estudiamos la rentabilidad diagnóstica de ambas pruebas mediante el cálculo de su Sensibilidad (S), Especificidad (E) y Valores Predictivos Positivos (VPP) y Negativos (VPN). El contraste de hipótesis se evaluó con el test de McNemar, y la concordancia inter e intralaboratorio mediante los test kappa de Cohen y el coeficiente de correlación de Spearman, aceptando siempre una significación estadística menor de p<0,05.
Resultados: El sistema convencional tiene un mayor VPP para la detección de Conectivopatías en mujeres, y menores de 65 años (p < 0,001). Ambas técnicas aplicadas a las sospechas diagnósticas mostraron en nuestro medio altos valores predictivos positivos, a excepción de en la trombofilia. El patrón más frecuente fue el moteado fino, con un alto VPP y diferencias significativas interlaboratorios. Destaca la relación del Lupus Eritematosos Sistémico (LES) con el patrón AC1 Homogéneo y la ESP con patrón Nucleolar discreto AC-3. La mayoría de Conectivopatías presentan ANA positivos a una titulación baja (convencional (+) automatizado 1/160), a excepción de la Esclerodermia (ESP) que lo hace con titulaciones superiores (++ y 1/640 respectivamente). La S y E fueron mejores para el diagnóstico de Conectivopatía por el método convencional (S: 0,64, E: 0,90) frente al automatizado (S 0,69, E 0,77), p<0.001. La concordancia intralaboratorio 1 mostró mayor grado de acuerdo respecto al laboratorio 2 en relación a la positividad ANA-IFI y al grado de positividad en dos determinaciones. Sin embargo, el reconocimiento de patrones presentó mayor Índice Kappa en Laboratorio 2 (Kappa 0,763) a pesar de existir mayor decalaje temporal entre las determinaciones. Finalmente, la concordancia interlaboratorios fue buena (Kappa 0,627).
Conclusión: En nuestro trabajo la rentabilidad diagnóstica no parece aumentar con los sistemas de automatizado. Sin embargo, la interpretación de patrones a lo largo del tiempo parece ser más exacta que analizada de forma convencional. Se necesitan más estudios de estandarización de técnicas para el reconocimiento de patrones ANA-IFI.
Objetivos: Nuestro objetivo principal fue compara la utilidad en la práctica clínica de la determinación automatizada en pacientes con sospecha de Conectivopatía frente a una técnica convencional.
Material y métodos: Estudio descriptivo, retrospectivo y observacional sobre muestras sanguíneas de pacientes con sospecha de Conectivopatía que acudieron a consultas del Hospital Universitario Miguel Servet. Se analizó el reconocimiento de patrones ANAs mediante IFI sobre células HEp-2 de forma covencional (visual) y automatizada en dos laboratorios diferentes. Estudiamos la rentabilidad diagnóstica de ambas pruebas mediante el cálculo de su Sensibilidad (S), Especificidad (E) y Valores Predictivos Positivos (VPP) y Negativos (VPN). El contraste de hipótesis se evaluó con el test de McNemar, y la concordancia inter e intralaboratorio mediante los test kappa de Cohen y el coeficiente de correlación de Spearman, aceptando siempre una significación estadística menor de p<0,05.
Resultados: El sistema convencional tiene un mayor VPP para la detección de Conectivopatías en mujeres, y menores de 65 años (p < 0,001). Ambas técnicas aplicadas a las sospechas diagnósticas mostraron en nuestro medio altos valores predictivos positivos, a excepción de en la trombofilia. El patrón más frecuente fue el moteado fino, con un alto VPP y diferencias significativas interlaboratorios. Destaca la relación del Lupus Eritematosos Sistémico (LES) con el patrón AC1 Homogéneo y la ESP con patrón Nucleolar discreto AC-3. La mayoría de Conectivopatías presentan ANA positivos a una titulación baja (convencional (+) automatizado 1/160), a excepción de la Esclerodermia (ESP) que lo hace con titulaciones superiores (++ y 1/640 respectivamente). La S y E fueron mejores para el diagnóstico de Conectivopatía por el método convencional (S: 0,64, E: 0,90) frente al automatizado (S 0,69, E 0,77), p<0.001. La concordancia intralaboratorio 1 mostró mayor grado de acuerdo respecto al laboratorio 2 en relación a la positividad ANA-IFI y al grado de positividad en dos determinaciones. Sin embargo, el reconocimiento de patrones presentó mayor Índice Kappa en Laboratorio 2 (Kappa 0,763) a pesar de existir mayor decalaje temporal entre las determinaciones. Finalmente, la concordancia interlaboratorios fue buena (Kappa 0,627).
Conclusión: En nuestro trabajo la rentabilidad diagnóstica no parece aumentar con los sistemas de automatizado. Sin embargo, la interpretación de patrones a lo largo del tiempo parece ser más exacta que analizada de forma convencional. Se necesitan más estudios de estandarización de técnicas para el reconocimiento de patrones ANA-IFI.
Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Master
Notas: Se realiza entrega únicamente entrega telemática debido a pandemia actual.
Enlace permanente:
El registro pertenece a las siguientes colecciones:
Trabajos académicos > Trabajos Académicos por Centro > Facultad de Medicina
Trabajos académicos > Trabajos fin de máster