Papel del residuo W483 en las propiedades redox del factor de Apoptosis Humano (hAIF)

Gregori Arlandis, Javier
Ferreira Neila, Patricia (dir.) ; Moreno Loshuertos, Raquel (dir.)

Universidad de Zaragoza, CIEN, 2023

Máster en Biología Molecular y Celular

Resumen: AIF es una flavoproteína que produce la inducción de apoptosis, conocida esencialmente por su acción pro-apoptótica; sin embargo, debido a su cofactor FAD exhibe una acción NAD(P)H óxido-reductasa, además es posible creer que estas funciones estén relacionadas. En el presente estudio se ha realizado un estudio de la implicación en la actividad NADH oxidasa de hAIFΔ1-77 en la posición del residuo 483 (triptófano por Tirosina, Leucina y Glicina). Para ello, se ha probado la expresión a pequeña escala, se han producido a media escala las variantes de interés, se purifican las mutantes hAIFΔ77. Referente a la caracterización se determina el coeficiente de extinción molar de cada mutante, la estabilidad del dímero, la cinética en estado estacionario además del tiempo de vida media del complejo de transferencia de carga. Por esto, ha quedado expuesto que hAIF WT en concentraciones equimolares de NADH posee la capacidad de reducirse completamente. Asimismo, la forma oxidada de hAIF WT exhibe por NAD+ poca afinidad. También los residuos del centro activo son fundamentales para la función óxido-reductasa.

Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Master