000147617 001__ 147617 000147617 005__ 20241219115555.0 000147617 037__ $$aTESIS-2024-501 000147617 041__ $$aspa 000147617 1001_ $$aMacías León , Javier 000147617 24500 $$aCaracterización estructural de un nuevo anticuerpo anti-Tn tipo lectina y desarrollo de Nanobodies frente a glucanosiltransferasas de la pared celular de hongos para el tratamiento de infecciones fúngicas invasivas 000147617 260__ $$aZaragoza$$bUniversidad de Zaragoza, Prensas de la Universidad$$c2022 000147617 300__ $$a182 000147617 4900_ $$aTesis de la Universidad de Zaragoza$$v2024-490$$x2254-7606 000147617 500__ $$aPresentado: 12 12 2022 000147617 502__ $$aTesis-Univ. Zaragoza, , 2022$$bZaragoza, Universidad de Zaragoza$$c2022 000147617 506__ $$aall-rights-reserved 000147617 520__ $$aEsta tesis doctoral está enfocada en dos aplicaciones distintas del uso de fragmentos de anticuerpos.<br />En primer lugar hemos caracterizado las bases moleculares de la interacción entre el scFv-5E5 y su antígeno, unos motivos presentes en las proteínas MUC1 truncadas que se expresan en diversas células tumorales. Mediante difracción de rayos X hemos determinado que el scFv-5E5 reconoce principalmente el residuo de GalNAc (o antígeno Tn) del motivo APGST(Tn)AP, y además interacciona con dos residuos de la cadena peptídica, lo que otorga cierta promiscuidad al anticuerpo. Además, hemos estudiado la especificidad del sustrato determinando que solo reconoce efectivamente el motivo T(Tn)-X-P, siendo X cualquier aminoácido.<br />En segundo lugar hemos desarrollado nanobodies frente a la enzima Gel4, una de las ß-1,3-glucanosiltransferasas de Aspergillus fumigatus responsables de la remodelación de la capa de ß-1,3-glucanos de la pared celular, con el objetivo de explorar su eficacia para combatir infecciones fúngicas invasivas (enfermedades que matan en torno a 1.6 millones de personas al año). Al caracterizar la estructura cristalina de los complejos de Gel4 con dos de estos nanobodies (Nb3 y Nb4) descubrimos que se unen a zonas distintas de la proteína, uniéndose el Nb4 al dominio CBM43 y el Nb3 al dominio catalítico, que presenta una mayor conservación en ortólogos de la proteína. Además, se realizaron ensayos de supervivencia en gusanos y ratones para estudiar la protección ofrecida por el Nb3, mostrando supervivencias de hasta más del 80% dependiendo de la dosis administrada en ambos animales. Estos resultados demuestran que el Nb3 exhibe un papel protector contra diversos patógenos fúngicos y proporciona una posible estrategia para combatir estas enfermedades fúngicas invasivas.<br /> 000147617 520__ $$a<br /> 000147617 521__ $$97073$$aPrograma de Doctorado en Bioquímica y Biología Molecular 000147617 540__ $$9info:eu-repo/semantics/openAccess 000147617 6531_ $$ahongos 000147617 6531_ $$aanticuerpos 000147617 6531_ $$amarcadores tumorales 000147617 6531_ $$aestructura de la pared celular 000147617 691__ $$a0 000147617 692__ $$a 000147617 700__ $$aHurtado Guerrero, Ramón$$edir. 000147617 7102_ $$aUniversidad de Zaragoza$$b 000147617 830__ $$9485 000147617 8560_ $$fcdeurop@unizar.es 000147617 8564_ $$s3993753$$uhttps://zaguan.unizar.es/record/147617/files/TESIS-2024-501.pdf$$zTexto completo (spa) 000147617 909CO $$ooai:zaguan.unizar.es:147617$$pdriver 000147617 909co $$ptesis 000147617 9102_ $$aCiencias$$b 000147617 980__ $$aTESIS