| TAZ-TFG-2026-274 |
Mecanismos de resistencia de Salmonella al medio ácido
Rodrigo Latorre, Daniel
Cebrián Auré, Guillermo (dir.) ; Calero Martínez, Silvia (dir.)
Universidad de Zaragoza,
VET,
2026
Graduado en Ciencia y Tecnología de los Alimentos
Abstract: Salmonella enterica es un patógeno alimentario de gran relevancia por su capacidad para sobrevivir en entornos adversos, incluida la exposición a condiciones ácidas como las presentes en alimentos o el tracto gastrointestinal humano. Aunque los mecanismos generales de tolerancia al ácido han sido descritos, aún no se conocen con detalle los genes concretos implicados en esta adaptación. El objetivo de este Trabajo Fin de Grado fue identificar y evaluar genes que puedan estar implicados en la resistencia al medio ácido mediante un enfoque de predicción bioinformática combinado con el análisis experimental.
A partir de una revisión bibliográfica y el uso de la herramienta STRING, se creó una red de interacción proteína-proteína que permitió identificar genes candidatos, entre ellos tres RNA no codificantes. Los correspondientes mutantes isogénicos en Salmonella Typhimurium 14028s se validaron mediante PCR para confirmar la correcta inserción de los casettes de resistencia en cada gen.
Posteriormente se evaluó el crecimiento de la cepa parental y de los mutantes en medios LB y TSB acidificados. A pH 4,0 no se observó crecimiento en ninguna de las cepas, mientras que a pH 4,5 y 5,0 se pudieron detectar diferencias, siendo la cepa parental la que mostró un mayor crecimiento. Además, se realizaron ensayos de inactivación a pH 2 a partir de cultivos crecidos y recuperados en diferentes medios en los que todas las cepas tuvieron descensos de varios ciclos logarítmicos y el comportamiento entre mutantes y cepa parental dependió del medio.
Los resultados obtenidos indican que la resistencia al ácido en Salmonella es un proceso que depende de muchos factores en el que varios de los genes analizados podrían tener un papel relevante, especialmente en condiciones de acidez moderada.
A partir de una revisión bibliográfica y el uso de la herramienta STRING, se creó una red de interacción proteína-proteína que permitió identificar genes candidatos, entre ellos tres RNA no codificantes. Los correspondientes mutantes isogénicos en Salmonella Typhimurium 14028s se validaron mediante PCR para confirmar la correcta inserción de los casettes de resistencia en cada gen.
Posteriormente se evaluó el crecimiento de la cepa parental y de los mutantes en medios LB y TSB acidificados. A pH 4,0 no se observó crecimiento en ninguna de las cepas, mientras que a pH 4,5 y 5,0 se pudieron detectar diferencias, siendo la cepa parental la que mostró un mayor crecimiento. Además, se realizaron ensayos de inactivación a pH 2 a partir de cultivos crecidos y recuperados en diferentes medios en los que todas las cepas tuvieron descensos de varios ciclos logarítmicos y el comportamiento entre mutantes y cepa parental dependió del medio.
Los resultados obtenidos indican que la resistencia al ácido en Salmonella es un proceso que depende de muchos factores en el que varios de los genes analizados podrían tener un papel relevante, especialmente en condiciones de acidez moderada.
Tipo de Trabajo Académico: Trabajo Fin de Grado
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